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Reunión anual de Euro-ataxias |
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Los pasados días 25 al 27 de septiembre se celebró en Dublín la reunión anual de Euroataxias.
La bienvenida por parte de la organización estuvo a cargo del Profesor Barry Hunt (Ataxia UK) and Dr. Raymond Murphy (FASI), ambos con familiares afectados de ataxia. La primera conferencia científica ha sido sobre investigaciones en la ataxia de Friedreich. Coordina la mesa el Profesor Massimo Pandolfo El Profesor Richard Festenstein (Imperial College London, UK) nos explica como restaurar la expresión del gen de la frataxina en AF. Hace una exposición sobre las dos maneras en que aparece el ADN en las células, y es en forma de heterocromatina y como eucromatina, también la estructura de la cromatina y los niveles de empaquetamiento que presenta en el núcleo celular. Para que los genes puedan expresarse, es decir transcribirse a ARN y posteriormente traducirse a proteínas, el ADN ha de encontrarse en forma de eucromatina. Nos muestra un modelo de ojo de la mosca drosophila melanogaster (mosca del vinagre), donde hay genes que no se expresan por encontrarse en forma de heterocromatina el ADN, y lo compara con moscas sanas, también para hacer su exposición más educativa nos muestra nucleosomas donde se observa como el ADN aparece enrollado en las histonas, y como la parte más enrollado del ADN se encuentra en el centrómero del cromosoma, y cuando el ADN en otras regiones del cromosoma se encuentra muy condensado, es decir como heterocromatina, el ADN no se expresa, pues esta sería la causa primaria que presentan los afectados de AF. Los HDCA, inhibidores, revierten el silenciamiento del ADN en las células de los enfermos de AF. El ADN inactivo puede hacerse activo mediante activadores, y a la inversa el ADN activo puede silenciarse mediante silenciadores, que hacen que el ADN tome la estructura de heterocromatina. Dr Joel Gottesfeld (Scripps Research Institute, US). Fármacos para que se exprese el gen de la frataxina. Las moléculas que su grupo está trabajando son los inhibidores de las histonas desacetilasas, con el objetivo de que el ADN que se encuentra condensado en forma de heterocromatina debido a las expansiones de tripletes GAA-TCC, e inactivo y que no se expresa, adquiera la forma lasa es decir eucromatina y que el gen se exprese y la célula pueda fabricar frataxina. Han publicado 2 artículos en 2003 y 2006 sobre esto. Comprobaron que la benzamida BML-210 incrementa la frataxina, comprobándose que se incrementaba la cantidad de ARNm de la célula y también de la proteína, lo comprobaron en linfocitos primarios. Cómo los inhibidores de la HDCA incrementan la frataxina en vivo, esto lo han comprobado en los modelos de ratón KIKI, desarrollados por el Dr. Pandolfo. Han mostrado que estas moléculas actúan directamente en las histonas asociadas con el gen de la frataxina, incrementando la acetilación en residuos particulares de lisinas en histonas H3 y H4. Los estudios animales han demostrado la baja toxicidad biológica y la eficacia de estas moléculas en potenciales terapias para la AF. Nos mostraron diapositivas con gráficos con la expresión del ARNm y también con la expresión de la frataxina. Han buscado qué inhibidor funcionará mejor, es decir hará que se exprese mejor el gen por lo tanto se incremente la cantidad de frataxina, y que presente los menores efectos secundarios. Buscan diversos compuestos químicos inhibidores desarrollando y mejorando las moléculas originales. ¿Qué producto HDAC dará los mejores resultados? Nos muestran 2 compuestos químicos que pueden resultar terapéuticos. También muestra 3 compuestos con anticuerpos para HDAC1, HADAC2, HDAC3. Nos muestran fotos con las actuaciones de los diversos compuestos HDAC. Están analizando el mecanismo de los HDAC por estudios cinéticos. Comparan varios compuestos que han utilizado: TSA, SAA, MS-275 y 106 con HDAC3, y miran los efectos que han tenido sobre los cultivos celulares. La pregunta es ¿pueden resultar terapéuticos? La empresa Repligen está analizando la toxicidad que presentan los diversos compuestos, tratando de buscar aquel que presente mejor resultado en células y animales y menor toxicidad.
Dr. Piyush Vyas (Indiana University, US): TAT-frataxina terapia no viral para la ataxia de Friedreichs. Nos presenta las características más importantes que se dan en las ataxias. Formula la hipótesis de si podría servir la TAT-frataxina para curar la ataxia de Friedreich. Han comprobado que con TAT-frataxina en fibroblastos de enfermos con baja cantidad de frataxina, muestran el rescate de la misma, comparándolo con valores controles de frataxina y también en modelos animales, para desarrollar una terapia de sustitución de la enzima para AF. Han comprobado que se reduce la activación de la Caspasa 3, en los fibroblastos tratados con TAT-frataxina, y también en modelos Knock-on, miden el incremento de su supervivencia. También han medido otras enzimas como la de la Succinato deshidrogenasa, y la actividad de la frataxina sobre estas enzimas. Es decir han medido la actividad de diversas enzimas que intervienen en el ciclo de Krebs y en la cadena respiratoria, en los modelos tratados con la TAT-frataxina y en modelos sin tratar. De momento no tienen contacto con empresas farmacéuticas interesadas en desarrollar estas posibles terapias.
Professor Dolores Cahill (University College Dublin, Ireland). Estudios proteómicos en Ataxia de Friedreichs. Han identificado diferentes proteínas que resultan alteradas con las ataxias, presentado un amplio listado de las mismas y ahora estudian ¿cuáles resultan alteradas con todos los tipos de ataxia?, y el papel de estas proteínas en las ataxias. ¿Qué posibles drogas mejorarían?
Profesor Massimo Pandolfo (Hôpital Erasme-Université Libre de Bruxelles, Belgium). Ensayo clínico con Idebenone. Nos explica las distintas aproximaciones terapéuticas basadas en la patogénesis que se han ido ensayando para la AF. Coenzima Q-10, antioxidante. La tenemos en la mitocondria, y nos explica qué función realiza en la misma, que es transporte de electrones en la cadena respiratoria. Idebenona: Nos explica para qué sirve y de nuevo como van los ensayos clínicos. Nos hace un relato histórico desde los primeros ensayos realizados por el Dr. Pierre Rustin, y toda la literatura con dosis y resultados obtenidos. Fase I: Dosis de toxicidad, probado hasta 75 mg/kg/día. Fase II: Tolerancia doble ciego con placebo. Fase III: Han usado escala de ICARS para medir resultados neurológicos. La empresa Santhera, ha patrocinado 2 estudios. Uno en Europa y otro en USA. En Europa 3 dosis con placebo durante 12 meses a 204 personas con peso mayor de 25 kg. Se les pasa la escala de ICARS a las 52 semanas de tratamiento. Se les mide, capacidad de ejercicio, actividad del miocardio, escala FARS, resonancia magnética. También nos comenta los criterios de inclusión y exclusión seguidos y las características del ensayo, que él coordina para Europa. Mitoquinona. No se sabe nada de nuevo, los ensayos no han pasado del nivel de estudios en fibroblastos, ni siquiera se han realizado a nivel de ratones. EPI-A0001 Responsable la compañía Edison de USA. Es un estudio que se ha responsabilizado esta compañía propiciado por FARA. Pretende conseguir con este compuesto que los enfermos de AF tengan más energía y que sus células no mueran ha mostrado en ensayos celulares, incluso a concentraciones muy bajas, que es capaz de incrementar significativamente la cantidad de energía producida por la mitocondria y en reducir claramente estrés oxidativo mitocondrial. Quelantes: La deferriprona es el único compuesto con el que se están realizando un ensayo clínico. Que incrementen los niveles de frataxina: ¿con qué moléculas? RhuEPO: Lo único publicado son los resultados con 2 meses de tratamiento, lo que no es significativo. No se ha demostrado que incrementen en los enfermos los niveles de frataxina, o al menos no se han publicado resultados. Disminuir el efecto de las repeticiones GAA. Es lo explicado anteriormente con las HDAC y otros agonistas, pero de momento está a nivel básico, y no se prevé que puedan estar disponibles en ensayos para humanos en un corto periodo de tiempo. . Dr. Arnold Munnich (Hôpital Necker-Enfants-Malades and Université Paris V René Descartes, France). Ensayo clínico con Deferiprone La idebenona parece que se ha comprobado que disminuye la fatiga, mejora la coordinación y la vocalización. Resultará el deferiprone ¿mejor o peor que la idebenona? Nos muestran varias fotos de RMI donde se observa la concentración de hierro en el núcleo dentado de los enfermos. Hay un modelo de ratón KO que reproduce la enfermedad. El deferriprone mueve el hierro de la mitocondria y no produce déficit de hierro en otros lugares. Por medio de fluorescencia muestran que el hierro lo extrae de la mitocondria. Comprueban varios parámetros bioquímicos. Están en un ensayo promocionado por la empresa Apofarma. Fase I: 11 adolecentes 7 chicas y 4 chicos entre 14-23 años. Nos explica los criterios de inclusión y exclusión que se han tenido en cuenta para el ensayo. Se han observado que mejora el temblor, la voz y los movimientos delicados, también la incontinencia y el constipado, y que los mejores resultados se han obtenido en las personas de 14 años. El ensayo programado es multicentro para 80 personas, de los cuales 40 sn niños y 40 adultos. La dosis a emplear es de 40 mg/kg/día hasta 80 mg/kg/día. Mientras esten tomando el deferiprone no podrán tomar simultaneamente idebenona. Los efectos adversos observados es fatiga en 2 niños y temblor, agrunalocitosis en 1 y en 2 pacientes tratados a dosis de 80 mg serios efectos adversos que han sido reversibles.
Professor Martin Delatycki (Murdoch Childrens’ Research Institute, Melbourne, Australia). Medidas de resultados clínicos en ataxia de Friedreichs. Qué medir, cuando se evalúan a los enfermos de ataxia de Friedreich. Ellos se han fijado en los movimientos oculares. Miden los movimientos espontáneos de los ojos, si el ojo responde a los movimientos, los movimientos sacádicos, etc. Han participado 20 personas para establecer las escalas. Cuando han estudiado la función vestibular, la comparan con un grupo de control y ven como se separan de la media. Las conclusiones que han sacado es: · Existe disfunción en los movimientos del ojo · Latencia progresiva del rango normal · Función vestibular anormal.
Profesor Olaff Riess. Universidad de Tubingen, Alemania. Patogénesis de los desórdenes por poliglutaminas. Mecanismos de la enfermedad. Nos explica lo que se hace en cada laboratorio. Interacción proteica y estructura de proteínas. Generación de cristales de proteínas para determinar su estructura. Tratamientos seguramente podrán estar relacionados con otras enfermedades que también están producidos por poliglutaminas. Están buscando tratamientos, pero ninguna ha resultado para las ataxias dominantes.
Dr Thomas Klockgether (University of Bonn, Germany). Proyectos clínicos de EuroSCA. Es coordinador de la red europea de ataxias dominantes EUROSCA. Nos explica que EUROSCA está constituido por 17 centros clínicos y 10 proyectos. Proyecto y desarrollo e infraestructura para la intervención de ensayos sobre ataxias dominantes. Nos habla de las escalas que utilizan y las que han establecido: SARA, nueva escala de ataxias, consta de 8 ítems basados en análisis neurológicos. Multivariación del análisis. INRS: Inventario de 16 síntomas-síndromes que aparecen en las SCAs: hipoarreflexia, arreflexia, síntomas sensoriales, disfunción urinaria, etc. También nos explica una tabla donde aparece la edad media de inicio de las enfermedades. Aplicando la escala de SARA han determinado la progresión de la enfermedad en 12 meses para las siguientes: Nº enfermos 95% de los casos SCA1 104 1,9-3,2 SCA2 103 0,97-1,8 SCA3 116 1,05-1,8 SCA6 80 0,06-1,13 Pasan a los enfermos un cuestionario sobre la enfermedad que lógicamente es subjetivo con diversos ítems. También pasan escalas de depresión/ansiedad Han tabulado una serie de cuestiones y las han presentado También han presentado el proyecto RISCA que es un proyecto de observación en SCAS 1, 2, 3 y6. Intervienen 8 centros clínicos de 8 países europeos
Dr Matthew Wood (University of Oxford, UK). RNA de interferencia terapia potencial para las ataxias dominantes, focalizado en el modelo de SCA7 En cuanto a posibles terapias están estudiando los ARN de interferencia focalizado a en las SCA7. También estos ARNi se están ensayando en otras enfermedades como Duschenne, Parkinson y SCA7. Esta terapia consiste en modificar el ARNm, en procesarlo y repararlo, silenciándolo mediante el ARNi SCA7 Producida por Poliglutaminas, es una enfermedad de herencia dominante. Expansión CAG en el gen ATXN7. Patología degeneración cerebelosa y de la retina. Lo que hacen es buscar el silenciamiento específico del mutante ATXN7 y lo estudian con la luciferasa el silenciamiento del ARNm. La duda es si se corrige el fenotipo en el mutante, y esto se comprueba con el estudio de proteínas celulares. En el año 2003, se ha observado que el producto MiR-P16 silencia y se han usado en linfoblastos de pacientes SCA7 y modelos animales knockin.
Dr Sylvia Krobitsch (Max-Planck Institute for Molecular Genetics, Germany). Ataxia espinocerebelosa tipo 2: Caracterización funcional de ataxin-2 por moléculas inhibidoras. Tratan de buscar combinación in vitro/in vivo, una selección proteína-proteína interacción con moléculas inhibidoras. In vitro seleccionan partículas que actúan como anticuerpos. In vivo seleccionan anticuerpos, y siguiendo varias estrategias y realizando selección de moléculas.
Dr. Alastair Wilkins (University of Bristol, UK) Células madre de médula ósea y su papel potencial en ataxias degenerativas. Nos muestra diferentes tipos de tejidos celulares: cartílago, adipocitos, osteocitos. Suponen que trasplantando células MSCs supondría protección del sistema nervioso en las ataxias. Lo que pretenden es convertir células madre hematopoyéticas en neuronas. Los pasos que dan son los siguientes: Aislar las células, expandirlas, estudiar su versatilidad y diferenciación potencial, producción de factores neurotróficos, y que no presentan problemas inmunes por ser autólogas. Los potenciales mecanismos de protección cerebelosa mediante las MSCs podrían ser: Reemplazo celular, emisión de factores neurotróficos, fusión celular, modulación inmune. Nos explica en qué consiste cada una de esas posibilidades. ¿Cómo actúan los factores tróficos? Las neuronas de Purkinje sobreviven en presencia de MSCs, y se ha comprobado que las han protegido de las lesiones del daño oxidativo, y también se ha comprobado que protegen a las neuronas cuando se les priva de factores tróficos, es posible que las MSCs condiciones otras señales del medio celular. ¿Qué factor desconocido tienen las MSCs?: Fusión celular: supone que una célula sana rescata la función de otra célula enferma. El problema es el bajo rendimiento encontrado Supondría expresión de genes del donante. El donante protege/rescata o expresan los factores requeridos para la supervivencia de la célula dañada y que son la causa de su muerte. El futuro trabajo que tienen es hacerlo in vivo con ratones previamente fabricados, entender mejor la fusión celular y estudiar la ingeniería de células que producen factores tróficos.
El sábado tuvo lugar la reunión de socios de Euroataxia, donde se propusieron posibles mejoras para la organización. La reunión estuvo dirigida por la asociación irlandesa y de UK. Se realizó un trabajo de grupo donde cada país indicaba qué líneas estaba trabajando y resultados obtenidos. También desde Ataxia UK se han comprometido a contratar a una persona durante 3 años para que se responsabilice de Euroataxia y conseguir financiación europea para la organización.
Septiembre de 2008.
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La
inauguración oficial la realizó la Ministra de Salud, que habló de la
problemática de las ataxias en Irlanda, y que hay censadas 200 personas
que padecen la enfermedad en el país.
Investigaciones
en ataxias cerebelosas dominantes. Coordina el Profesor Koenig
